Home » » Pemeriksaan Kolesterol Metode Kolorimetrik enzimatik CHOD-PAP

Pemeriksaan Kolesterol Metode Kolorimetrik enzimatik CHOD-PAP

Written By edi sukarman on Friday, April 12, 2013 | 9:17 AM



Pemeriksaan Kolesterol Metode Kolorimetrik enzimatik CHOD-PAP


PRAKTIKUM 2
PEMERIKSAAN KOLESTEROL
1.    Hari / Tanggal     :
2.    Metode                 : Kolorimetrik enzimatik CHOD-PAP
3.    Prinsip                 :
Kolesterol ditentukan secara enzimatik menggunakan kolesterol esterase dan kolesterol oksidase. Hidrogen peroksida membentuk warna merah bila bereaksi dengan 4-aminopenazone dan fenol dibawah pengaruh peroksidase. Intensitas warna sebanding dengan konsentrasi kolesterol dan dapat  ditentukan secara fotometrik (Anonim, 2003).
4.    Reaksi                  :
Kolesterol ester + H2O  -- chol. esterase  --> cholesterol + fatty acid
Kolesterol + O2 -- chol. oxidase --> 4-cholestone-3-one + H2O2
2H2O2 + 4-aminophenazone + phenol ---  peroksidase
  --> 4-(p-benzoquinone-monoimino)- phenazone + 4H2O2
5.    Dasar Teori         :
Tes kolesterol total metode CHOD-PAP merupakan metode pengukuran kadar kolesterol dalam darah yang menggunakan bantuan 3 enzim, yaitu : kolesterol esterase, kolesterol oksidase dan perolsidase.
Alasan penggunaan enzim dalam pengukuran adalah bahwa pengukuran dengan enzim yang sangat khas, kecilnya konsentrasi senyawa yang akan diukur serta alasan praktis menyangkut kemudahan, kecepatan dan ketepatan diagnosis.
Kolesterol ester yang terdapat dalam sampel dihidrolisis oleh kolesterol esterase menjadi kolesterol bebas dan asam lemak. Selanjutnya kolesterol dioksidasi oleh kolesterol oksidase menghasilkan hidrogen peroksida. Hidrogen peroksida ini akan bereaksi dengan 4-aminofenason dalam suatu reaksi yang dikatalisis oleh peroksidase, menghasilkan 4-(p-benzokinon-monoimino)-fenason yang berwarna merah. Intensitas warna yang terbentuk sesuai dengan konsentrasi kolesterol.
6.    Cara Kerja           :

Blanko
Standar
Sampel
Reagen Kerja
Standar
Serum
500 µl
------
------
500 µl
5 µl
------
500 µl
------
5 µl

Campur dan inkubasi selama 10 menit pada suhu 20 – 25 0C atau 5 menit pada suhu 37 0C pengukuran absorbans dari sampel atau standar juga reagen balnko (Δ A) dalam 60 menit.
7.    Nilai Normal        :  150 – 200 mg/dl
8.    Hasil                     :


Pemeriksaan Kolesterol Metode Kolorimetrik enzimatik CHOD-PAP

0 comments:

Post a Comment

Powered by Blogger.

Site Info